77777亚洲午夜久久多人-7777久久亚洲中文字幕-а√天堂中文在线资源bt种子-欧洲美熟女乱又伦免费视频

歡迎來到武漢普諾賽生命科技有限公司網站!
咨詢熱線

400-999-2100

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞學堂 | RAW 264.7誘導極化及鑒定大全

細胞學堂 | RAW 264.7誘導極化及鑒定大全

更新時間:2023-02-03  |  點擊率:2960

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)是破骨細胞、炎癥研究最-常用的體外模型之一,被廣泛用于研究風濕性關節炎、骨質疏松癥、骨質溶解、牙周炎等骨骼疾病。


極化方式


巨噬細胞是具有異質性的一類免疫細胞,在體內外不同環境影響下可極化為不同表型參與機體生理、病理反應。從激活方式上分為經典激活的巨噬細胞M1選擇性激活的巨噬細胞M2


1

M1型分化

細菌和脂多糖(LPS)可以誘導巨噬細胞向M1型分化,產生促炎細胞因子,抵抗病原入侵,但也會造成機體損傷,在實驗中可采用2.5ng/mL IFN-γ和200ng/mL LPS共同作用12小時誘導其極化


640.png

圖1. a.RAW 264.7 未分化形態圖 b.RAW 264.7 M1型分化形態圖




2

M2型分化

白細胞介素(IL-4)可以誘導巨噬細胞向M2型分化,分泌抗炎細胞因子,并在組織修復與重建和腫瘤的形成過程中發揮作用,在實驗中可采用10ng/mL IL-4作用12小時誘導其極化


圖2. RAW 264.7 不同分型形態圖



鑒定方法


M1、M2具有各自特征性標志分子,iNOS、CD86、TNF-α是常見的M1型巨噬細胞的標志分子,IL-10、Arg-1、CD206是常見的M2型巨噬細胞標志分子。一般在實驗研究中:

1

WB可以分析RAW264.7細胞iNOS、YM-1和Arg-1的表達水平(如圖3);


圖3. WB分析照射對IL-4誘導的RAW264.7細胞YM-1和Arg-1的表達影響

2

流式細胞術(FCM)可以分析RAW264.7細胞表面CD86和CD206的表達(如圖4);


640 (2).png

圖4. 流式細胞術分析照射對IL-4誘導的小鼠RAW264.7細胞CD206和CD209的表達

3

實時定量 PCR 和 ELISA 可以分析IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-12 及 IL-10 等細胞因子的表達及分泌(如圖5);


640 (3).png

圖5. 用于實時熒光定量PCR的引物序列

4

Griess reagent 可以分析細胞培養上清 NO 生成(如圖6)。


圖6. 不同樣品對RAW 264.7中NO產生的影響


參考文獻


[1] 羅進芳, 朱瑞麗, 易浪,等. 青藤堿對LPS、IL-4誘導的小鼠RAW264.7巨噬細胞極化的影響[J]. 中國免疫學雜志, 2015, 31(1):5.

[2] 陳濤, 梁瀟, 賀明,等. RAW264.7細胞M1/M2亞型的誘導和鑒定[J]. 中國分子心臟病學雜志, 2011(2):4.

[3] 解海榮, 李貞, 李海亮 ,等. 不同照射方式對IL-4誘導的小鼠RAW264.7細胞極化的影響. 中國輻射衛生, 2017, 26(6): 637-641.

[4] Li C, Du Y, Lv H, et al. Injectable Amphipathic Artesunate Prodrug-Hydrogel Microsphere as Gene/Drug Nano-Microplex for Rheumatoid Arthritis Therapy[J]. Adv. Funct. Mater. 2022, 32, 2206261.

[5]  Li P ,  Hao Z ,  Wu J , et al. Comparative Proteomic Analysis of Polarized Human THP-1 and Mouse RAW264.7 Macrophages[J]. Frontiers in Immunology, 2021, 12:700009.

[6] Ji-Eun Lee, Jae Hoon Lee, Byungrok Min,et al. Immunostimulatory effect of egg yolk phosvitin phosphopeptides produced by high-temperature and mild-pressure pretreatment and enzyme combinations in RAW 264.7 cells via TLR2/MAPK signaling pathway[J].Journal of Functional Foods,Volume 98,2022,105264.



主站蜘蛛池模板: 黑鬼大战白妞高潮喷白浆| 成人做受黄大片| 国产精品一区二区av交换| 婷婷四房综合激情五月在线| 非洲黑人性xxxx精品| 国产精品无码久久久久久| 日本爽爽爽爽爽爽在线观看免| 国产高潮国产高潮久久久| 东北老头嫖妓猛对白精彩| 99热久久这里只精品国产www| 性强烈的欧美三级视频| 好大好硬好深好爽想要寡妇| 中文字幕无码乱人伦| 中国女人内谢69xxxx| 日本公与熄乱理在线播放| 18禁美女裸体网站无遮挡 | 区二区欧美性插b在线视频网站| 国产 亚洲 制服 无码 中文| 久久99精品国产麻豆| 日韩aⅴ人妻无码一区二区| 豆国产95在线 | 亚洲| 亚洲日韩欧洲乱码av夜夜摸| 亚洲 国产 韩国 欧美 在线| 男人的天堂在线视频| 亚洲综合一区无码精品| 日韩精品无码一区二区三区不卡| 激情航班h版在线观看| 精品久久亚洲中文字幕| 亚洲日本va中文字幕| 国产激情无码一区二区三区| 美女mm131爽爽爽| 男女超爽视频免费播放| 国产亚洲精品精品精品| yy6080久久亚洲精品| 亚洲精品97久久中文字幕无码| 最新国产精品剧情在线ss| 国产亚洲情侣一区二区无| 色噜噜亚洲精品中文字幕| 丰满少妇人妻久久久久久| 国产丝袜无码一区二区三区视频| 欧美最猛黑人xxxx黑人猛交|